細胞培養におけるマイコプラズマ検出ガイド

細胞生物学の分野を深く探究する博士課程の学生として、私の研究を常に脅かす敵が 1 つあります。それはマイコプラズマです。目に見えない形で細胞培養に侵入し、細胞を蝕むこの微小な細菌は、執拗な敵となっています。しかし、この細菌汚染の複雑さを理解することが、効果的な軽減への第一歩です。

目に見えない敵: 細胞培養におけるマイコプラズマ汚染の理解

この問題の重要性を理解するには、「なぜマイコプラズマは細胞培養に悪影響を与えるのか」という問いかけが重要です。マイコプラズマは細胞壁を持たない細菌の一種で、多くの一般的な抗生物質の影響を受けません。これらの小さく頑固な細菌は、細胞の機能、形態、代謝、成長特性を大幅に変化させる可能性があります。検出されない場合、研究データが不正確になり、研究が損なわれ、論文が撤回される可能性があります。さらに、細胞壁を持たないため、ペニシリンなどの一般的な抗生物質に耐性があり、汚染に対処することがさらに困難になります。

浸潤と増殖: 細胞培養におけるマイコプラズマの侵入と増殖の仕組み

細胞培養におけるマイコプラズマの侵入と増殖の方法は数多くあり、多くの場合、巧妙です。ほとんどの場合、人間の作業者が無意識のうちにこれらの細菌を滅菌環境に持ち込んでいます。これは、不適切な取り扱い方法や研究者の皮膚や息による汚染が原因で発生することがあります。あるいは、汚染された培養培地、試薬、または感染した細胞株がマイコプラズマの発生源となることもあります。

細胞培養増殖におけるマイコプラズマの行動様式により、その脅威は増大します。1 つの汚染されたフラスコが、すぐに特定して対処しないと、すぐに研究室全体の問題につながる可能性があります。細菌は、通常の細胞培養手順中に生成されたエアロゾル、汚染された培養培地、または十分に滅菌されていない共有の研究室機器を介して広がる可能性があります。

検出の技術: 細胞培養におけるマイコプラズマ汚染の特定

細胞培養におけるマイコプラズマ汚染の検出は、培養物の外観に劇的な影響を与えることなく存在できるため、困難な場合があります。検出方法はいくつかあり、DNA 染色、酵素活性、PCR アッセイ、培養分離などがあります。

たとえば、DNA の A-T リッチ領域に強力に結合する蛍光染色剤である DAPI (4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール) を使用できます。紫外線下では、DAPI 染色された DNA は明るい青色の蛍光を発し、潜在的なマイコプラズマ汚染を視覚化できます。

さらに、PCR ベースの検出アッセイは、その高い感度と特異性により、ゴールドスタンダードと見なされています。これらのテストでは、汚染物質の DNA を増幅するため、低濃度でも簡単に検出できます。

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マイコプラズマ検出キット

サイズ 20 または 50 テスト

保存 -20°C

アッセイ時間 1 時間

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マイコプラズマ除去キット

サイズ 100 または 500µL

保存温度 -20°C

アッセイ時間 3～7 日

キットを見る

脅威の管理: マイコプラズマ汚染の処置と回避

培養物が汚染されていることが判明したら、直ちに対処する必要があります。多くの研究者が「細胞培養物からマイコプラズマ汚染を取り除くにはどうすればいいか」と尋ねます。標準的な答えは、苦痛ではありますが、汚染された培養物を完全に廃棄することです。これができない場合は、マイコプラズマに効果のあるテトラサイクリンやフルオロキノロンなどの抗生物質を含む市販のキットが多数あります。

ただし、予防は治療よりも重要です。細胞培養のすべての段階で厳格な無菌技術を維持することが重要です。細胞培養物の定期的な検査と、マイコプラズマを含まない培地と試薬の使用も、クリーンな細胞培養環境に貢献します。

マイコプラズマの培養という複雑な作業

細胞培養ラボでは日常的に行われていませんが、マイコプラズマは特定の条件下で培養できます。たとえば、マイコプラズマ・ニューモニエはイートン寒天培地上で増殖できますが、ステロールやタンパク質源など、正確な条件と非常に特殊な環境が必要です。

結論として、マイコプラズマ汚染との戦いは、細胞培養ラボにおける永続的な課題です。これらの細菌の性質を理解し、厳格な細胞培養方法を維持し、効果的な検出戦略を展開することが、その影響を管理する鍵となります。困難な作業に思えるかもしれませんが、マイコプラズマの封じ込めに成功することは、実行可能であるだけでなく、細胞培養研究の正確性と信頼性を確保するために不可欠です。

細胞培養におけるマイコプラズマ検出ガイド

目に見えない敵: 細胞培養におけるマイコプラズマ汚染の理解

浸潤と増殖: 細胞培養におけるマイコプラズマの侵入と増殖の仕組み

検出の技術: 細胞培養におけるマイコプラズマ汚染の特定

マイコプラズマを検出して除去します！

脅威の管理: マイコプラズマ汚染の処置と回避

マイコプラズマの培養という複雑な作業

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